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PCR/qPCR耗材選擇——一般特征篇
2023-02-13
(1)規格常見的PCR/qPCR耗材規格如下管:0.5mL,0.2mL,0.1mL96孔板:0.2mL,0.1mL384孔板:0.02mLPCR/qPCR管/板的規格決定了反應體積。如果加入過多的樣品,一方面會導致熱傳導的效率下降,另一方面會導致樣品溢出或者污染;如果加入的樣品過少,又會因為頻繁的熱循環導致水分蒸發,進而導致體系不足、樣品損耗,實驗出現誤差或者無結果。并且選用的耗材需根據PCR儀的加熱模塊來決定,以求最DA程度的熱傳導的匹配。(2)高度PCR/qPCR管/板有...
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PCR/qPCR耗材選擇——材料及顏色篇
2023-02-09
目前市場上大多數PCR/qPCR管材選用的是聚丙烯材料。聚丙烯是一種惰性的有機材料,對反應物質的吸收值最小,并且聚丙烯可以承受PCR過程中的溫度變化,在經過溫度變化后不易變形,因此可以確保獲得最佳的PCR結果。在生產過程中,為了保證生物兼容性、純度以及批次間的一致性,應當使用全新的醫學級的分子生物學級別的高品質的聚丙烯作為原料進行生產。有些PCR/qPCR板為了配合高通量機器人的操作,需要具有更高強度的邊框來配合機器人的抓取,通常情況下邊框的材料使用的是更高強度的聚碳酸酯。在...
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提取FFPE組織中的核酸時的難點
2023-02-07
使用福爾馬林固定過組織,其組織中的蛋白質與核酸(DNA與RNA)會失去生物活性。福爾馬林和石蠟作為固定劑和包埋劑,將細胞保護在其中,十分影響核酸的提取,并且長時間的保存可能會使樣品中的核酸發生降解。傳統的方法會使用二甲苯來溶解石蠟,這種有機溶劑高度易燃,在實驗過程中需要先多次使用二甲苯來溶解石蠟,之后需要多次使用乙醇來沖洗殘留的二甲苯。在使用二甲苯溶解石蠟的過程中,大量的二甲苯可能會對核酸造成損傷,進一步加劇核酸的降解;在溶解與沖洗過程中,即使再仔細也難免將寶貴的組織材料沖掉...
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小蝴蝶昆蟲培養基的使用要小心加謹慎
2023-02-03
小蝴蝶昆蟲培養基的關鍵是培養基配方的開發,已有多種培養基用于支持昆蟲細胞系的生長。昆蟲細胞培養所用培養基一般均補加FBS,血清提供了細胞生長過程中所需的營養物質和微量元素,使細胞能健康生長和傳代。但是FBS的使用也存在著缺點:價格高;每批血清的質量不同,影響細胞的生長和病毒復制;血清中的蛋白影響從培養的上清液中分離和提取重組蛋白,使蛋白的純化更加困難;血清易被支原體污染。由于部分加入胎牛血清或牛血清使典型昆蟲培養基變得很復雜。因此,無論工業上或學術上,開發無血清培養基都是必然...
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CELLSCRIPT™體外加帽試劑盒工作原理
2023-02-01
CELLSCRIPT™的使命是提供好的轉錄產品和技術,用于制造和使用RNA以便進行臨床研究和治療的細胞翻譯。目前的產品包括多種體外轉錄試劑盒、加帽類似物或加帽酶的5'RNA加帽試劑盒和3'RNA多聚腺苷酸化的試劑盒,以及用于轉錄、加帽、poly(A)尾mRNA以進行翻譯的多合一試劑盒。其中,ScriptCap™Cap1CappingSystem(C-SCCS1710)包含ScriptCap加帽酶、ScriptCap2'-O-甲基轉移酶、GTP和SAM等...
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ALZET泵的原理
2022-12-10
ALZET泵的簡介:當泵體被植入動物體內時,由于滲透壓差迫使體液透過泵表面的半透膜流向高滲鹽夾層,擠壓貯藥囊,使藥物按照預定速度經導流管釋放到動物體內。、ALZET泵的原理:泵內的滲透層與植入泵的組織環境之間產生滲透壓差。滲透壓泵可被埋植在實驗動物的皮下或者腹腔,滲透層與泵體埋植組織之間高滲透壓導致組織內水分從泵的外表面的剛性半透膜流入泵。當水進入滲透層時,會壓縮由柔性的非滲透性膜組成的藥池,使測試溶液以可控的、預定的速率從泵中排出。ALZET泵的適用范圍:可用于大鼠(包括幼...
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牛血清的分類
2022-11-24
牛血清是細胞培養基中的中藥成份之一。在培養基中加入適量血清(10%),首先可以補充細胞生長所需的生長因子、激素、帖附因子等,其次它具有解毒作用,能解除脂肪酸、重金屬和某些蛋白酶的毒性;再次,它還能中止胰酶的作用,并保護細胞免受機械損傷等。但是血清成分復雜,不同來源、不同批號生產的血清對細胞生長作用的差異較大。血清的保存期只有一年,不同存放時期的血清的效力也不同。所以,當新購得的血清或要在開始一個重大試驗的時候,應首*行牛血清的篩選。篩選時,通常選用正常的二倍體細胞和不太好養的...
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Elastin 彈性蛋白/膠原酶是應用非常廣泛的消化劑
2022-11-23
Elastin彈性蛋白/膠原酶是廣泛應用的消化劑,胰蛋白酶是一種胰臟制品,對蛋白質有水介作用,主要作用于賴氨酸或精氨酸相連接的肽鍵,使細胞間質中的蛋白質水介而使細胞分散開,在常用的蛋白酶中由于產品的活力和純度不同,對細胞的消化能力也不同,胰蛋白酶對細胞的作用,取決于細胞類型、酶的活力、配制的濃度、消化的溫度、無機鹽離子、pH以及消化時間的長短等。是一種從細菌中提取出來的酶,對膠原有很強的消化作用,適于消化纖維性組織、上皮組織以及癌組織,它對細胞間質有較好的消化作用,對細胞本身...